8-OHdG ELISA分析試劑盒

8-OHdG ELISA分析試劑盒僅供研究使用

靈敏度：0.59 ng / mL
動(dòng)態(tài)范圍：0.94 – 60 ng / mL
孵育時(shí)間：1小時(shí)
樣品類(lèi)型：細(xì)胞裂解液，血漿，樣品基質(zhì)，尿液
樣品量：50μL

StressMarq在加拿大制造的產(chǎn)品。

分析背景

8-羥基-2-脫氧鳥(niǎo)苷（8-OH-dG）是由活性氧和氮對(duì)DNA的氧化破壞而產(chǎn)生的，并作為氧化應(yīng)激的既定標(biāo)志物。鳥(niǎo)嘌呤的羥化反應(yīng)是對(duì)正常代謝過(guò)程和多種環(huán)境因素（即增加活性氧和氮種類(lèi)的任何物質(zhì)）的響應(yīng)。8-OH-dG的水平升高與衰老過(guò)程以及許多病理狀況（包括癌癥，糖尿病和高血壓）有關(guān)。在復(fù)雜的樣品（例如血漿，細(xì)胞裂解物和組織）中，8-OH-dG可以以游離核苷的形式存在，也可以以摻入DNA的形式存在。血液進(jìn)入腎臟后，游離的8-OH-dG會(huì)很容易地過(guò)濾到尿液中，而較大的DNA的片段則保留在血液中。由于血漿樣品的復(fù)雜性，尿比血漿更適合用于測(cè)量游離的8-OH-dG。尿液中的8-OH-dG的尿酸水平在2.7-13 ng / mg肌酸之間，而據(jù)報(bào)道，通過(guò)LC-MS測(cè)定，血漿中游離的8-OH-dG的血漿水平在4-21 pg / ml之間。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
如果在包裝盒外部指示的有效日期之前按指示存放和使用組件，則該套件將按照特定的方式運(yùn)行。除標(biāo)準(zhǔn)溶液外，所有試劑均在4°C下穩(wěn)定，標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)在-20°C下保存。為了獲得存儲(chǔ)效果，應(yīng)將8-OHdG標(biāo)準(zhǔn)品等分成小份，然后適當(dāng)存儲(chǔ)。避免重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)（10 µL標(biāo)準(zhǔn)品可以繪制三份標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

測(cè)定步驟

1. 在樣品和標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑中制備標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。
2. 將50 µL準(zhǔn)備好的標(biāo)準(zhǔn)液和樣品一式三份加到適當(dāng)?shù)目字小?/font>
3. 將50 µL稀釋的抗體制劑添加到適當(dāng)?shù)目字小?/font>
4. 用板蓋蓋好板，然后在室溫（20-25°C）下孵育1小時(shí)。
5. 用1X洗滌緩沖液洗滌板4次。
6. 向每個(gè)孔中添加100 µL TMB底物。
7. 蓋好板并在室溫下于黑暗中顯影該板30分鐘。
8. 向每個(gè)孔中添加100 µL終止溶液。
9. 在酶標(biāo)儀上于450 nm處測(cè)量吸光度。
10. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并計(jì)算樣品濃度。